Medical Technology 50巻13号 (2022年12月発行)

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特集　今日から役立つ　形態学的検査,がんゲノム検査の検体取り扱い

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　固定　総論塩竈　和也 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1372-1377

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＜point＞◆固定とは,細胞･組織の形態を保つための最重要操作である.この操作が不十分だと,染色性やゲノム解析にまで悪影響を及ぼすため,迅速かつ適切な処理が求められる.◆臨床現場では,材料に応じて固定液を使い分ける頻度は低いものの,これまでにさまざまな固定液が考案されている.各種固定液の特性を理解し,材料に合わせて固定液を使い分ける知識を身につける.◆ホルマリン固定パラフィンブロックは,現在ではゲノム医療に欠かせない材料として注目されている.ゲノムDNAの品質管理がゲノム解析の結果を左右するため,精度管理の観点から固定の重要性を理解する.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　固定　乳腺川崎　卓弥 , 杉野　隆 , 刀稱　亀代志 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1378-1380

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＜point＞◆中性緩衝ホルマリンの使用が推奨されているが,非緩衝ホルマリンよりも固定力が弱く,固定不良になりやすいため,注意が必要である.◆乳腺組織は脂肪を多く含む組織であり,腫瘍部が組織深部に存在することが多いため,迅速な固定を促す処理が必要である.◆がんゲノム検査などへ良質な品質の検体を供与するためには,6～72時間の固定時間の厳守と管理が重要である.

乳腺組織はなぜ固定液の浸透が悪いのか川崎　卓弥 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1381

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(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　固定　肺龍見　重信 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1382-1385

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＜point＞◆肺は含気臓器であるため,組織採取時に人工的虚脱が生じ,そのままでは十分にホルマリン固定されない.◆肺胞内の空気をホルマリンで置換する注入固定が必要となる.◆分子標的治療の多い肺癌は分子学的診断に供する頻度が高いため,核酸品質にも留意した固定を行う.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　固定　消化管石井　脩平 , 阿部　仁 , 河内　洋 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1386-1390

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＜point＞◆ホルマリン固定は,組織形態の保持のみならず免疫組織化学染色や遺伝子検査の結果に大きな影響を与えるため,適切な管理が必要である.◆外科的切除検体では,固定不良や過固定などを避けるために,遺伝子検査用に腫瘍の一部を取り分け10%中性緩衝ホルマリンで固定しておくといった工夫も有用である.◆内視鏡生検では,固定の管理だけでなく検体の取り違えが発生しづらい方法でホルマリン固定を行うことが大切である.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　固定　肝,脾,腎伊藤　聡史 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1391-1393

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＜point＞◆固定は病理診断のプレアナリシス段階として重要な位置づけにあり,標準化が望まれる.◆肝臓,脾臓,腎臓は固定不良に陥りやすい臓器であるため,質の高い病理標本作製や遺伝子解析のためにそれぞれの固定操作を熟知し,適切な固定操作を完了させる必要がある.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　固定　リンパ節澁木　康雄 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1394-1396

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＜point＞◆リンパ腫診断のためのリンパ節生検は,病理組織標本の作製以外にもサンプリングが必要である.◆郭清リンパ節の固定は,所属リンパ節ごとに大きさや個数を考慮し行う.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　固定　中枢神経系関　絵里香 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1397-1399

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＜point＞◆固定前の脳は非常に軟らかいため,脳を変形させないように固定することが重要である.そのため,固定前に長時間解剖台の上に放置しない.また,固定する際は固定容器に脳の表面が密着しないようにする.◆病理解剖症例の脳の固定は浸漬固定が主流である.そのため,組織をなるべく薄くする,もしくは組織に割を入れるなどの処置によって,組織内部に効果的に固定液を浸透させることが肝心である.

脳はなぜ固定してから割を入れるのか関　絵里香 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1400

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(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　包埋　総論西川　武 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1401-1407

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＜point＞◆良質なパラフィン包埋は,溶媒を用いた良質な組織検体からの脱水により達成される.◆脱水を促進するさまざまな方法や,極性の概念と溶媒の組織浸透性の理解が重要である.◆パラフィン包埋過程で生じるアーチファクトは,組織脱水不良または組織の乾燥が大半である.◆組織の乾燥によるアーチファクトは取り返しがつかない.

パラフィン以外の包埋法には何があるのか西川　武 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1407

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(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　包埋　硬組織森藤　哲史 , 三浦　聡史 , 金羽　美恵 , 安井　寛 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1408-1413

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＜point＞◆病理検体で硬度を形成するおもな成分はカルシウムである.◆組織からカルシウムを除去する処理を｢脱灰｣といい,良質な標本作製には適切な脱灰処理を行うことが重要である.◆免疫組織化学や遺伝子検査を行う際には,エチレンジアミン四酢酸(EDTA)による脱灰が推奨される.

表面脱灰森藤　哲史 , 金羽　美恵 , 安井　寛 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1413

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(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　包埋　神経組織森藤　哲史 , 金羽　美恵 , 安井　寛 , 廣井　禎之 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1414-1419

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＜point＞◆中枢神経系は脳と脊髄で構成されており,組織中には多量の脂質が含まれる.◆包埋においては可能な限り完全な脱水･脱脂を行い,組織全体にパラフィンを十分に浸透させることが重要である.◆特に中枢神経組織においては大割切片が有用な場合があり,大型ブロックの作製にはより入念なパラフィン浸透処理が必要である.

大割切片はなぜ必要か森藤　哲史 , 金羽　美恵 , 安井　寛 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1419

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(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　包埋　乳腺川崎　卓弥 , 刀稱　亀代志 , 杉野　隆 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1420-1422

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＜point＞◆乳腺組織は脂肪を多く含む組織であるため,脱脂不良によるパラフィン浸透不良を起こしやすく,標本作製に支障をきたすことがある.◆良好な標本作製を行うためには,脱脂処理やパラフィン浸透に多くの時間をかける必要がある.◆包埋操作ではコンタミネーション防止のため,使用する器具やパラフィンを常に清潔な状態に保つことが重要である.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　薄切　総論廣井　禎之 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1423-1431

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＜point＞◆組織の断面を観察するためには組織を薄く切り,染色し,下から光を当てて光を透過させることが必要である.◆薄切には施設や個人の個性があり,統一された技術はない.◆薄切は具体的には｢切削｣により行われる.◆現在の病理検査で使用されているユング型ミクロトームは,ベアリング式が主流となりつつある.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　薄切　腎組織阿部　仁 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1432-1436

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＜point＞◆腎臓のパラフィン切片作製では,連続切片や2μm前後の薄い切片が要求されるため,高度な薄切技術が必要である.◆薄切時の障害となる代表的な要因に,静電気とパラフィンブロックの熱膨張がある.◆クロスドローラーベアリング式ミクロトームでは,滑走が滑らかで操作性に優れ,安定した切片を作製できる.◆｢厚さ設定ダイアル｣の目盛りはあくまで目安であり,切片の厚さは水に浮かべた切片の光沢を見ながら判断する.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　薄切　神経組織森藤　哲史 , 金羽　美恵 , 安井　寛 , 廣井　禎之 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1437-1441

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＜point＞◆中枢神経組織では,通常厚さ6～10μmの厚い切片が用いられる.◆厚い切片を作製する際には,ブロックを冷却せずに薄切を行う.◆大割切片の薄切には,良質なパラフィンブロックの作製とともにミクロトームに対するメスとブロックの固定を確実に行うことが重要である.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　薄切　連続切片廣井　禎之 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1442-1445

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＜point＞◆連続切片はHE染色と特殊染色のみならず,免疫組織化学を複数行う病理検査や病理学的研究にも必須である.◆連続切片は学生教育に有用である.◆連続切片の作製(薄切)は室温がおおよそ25℃以下となるよう,空調が調節された室内で行う.◆連続切片の薄切は,パラフィンブロックを冷やさず息かけか加湿器を用いて行う.

学生教育用標本作製のポイント廣井　禎之 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1445

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(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　伸展森藤　哲史 , 金羽　美恵 , 安井　寛 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1446-1449

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＜point＞◆伸展とは,切片を加温することによって薄切時に生じたシワや収縮などの物理的な変形を伸ばす工程のことである.◆伸展で生じるアーチファクトの原因と防止法に精通することが,良質な標本作製には重要である.◆切片の剥離防止のためには,適切な切片の貼り付け･乾燥を行う必要がある.

(1章)病理　ホルマリン固定･パラフィン切片　薄切未染色標本の保存渡部　顕章 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1450-1453

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＜point＞◆ホルマリン固定,パラフィン包埋した検体をFFPE(formalin-fixed paraffin-embedded)検体とよび,病理診断などで広く用いている.◆FFPE検体から薄切してスライドガラスに貼り付けた状態が,薄切未染色標本(未染標本)である.◆FFPE検体,未染標本は,高温多湿を避けて冷暗所で保存することが大切である.◆未染標本は切り置きをせず,必要時にその都度薄切することが望ましい.

(1章)病理　凍結切片法　総論青木　裕志 , 飯野　瑞貴 , 外山　志帆 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1454-1458

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＜point＞◆凍結切片法は,新鮮凍結切片作製法と固定後凍結切片作製法に分類され,術中迅速病理診断や酵素組織化学,脂肪染色などに用いられる.◆組織は,包埋皿と組織の間に隙間ができる大きさに切り出す.

(1章)病理　凍結切片法　固定後組織の凍結保護処理鈴木　美那子 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1459-1461

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＜point＞◆固定後組織の凍結切片は,おもに脂質の証明で用いられる.◆固定液はアルデヒド系の水溶液を選び,脂質が溶出するアルコール系は避ける.◆最良な組織形態を保つには,凍結前に必ず凍結保護剤や氷晶防止液で組織を浸漬させて,凍結中における組織内の氷晶形成を防ぐ.

(1章)病理　凍結切片法　組織凍結　外科病理組織(術中迅速病理診断) 青木　裕志 , 飯野　瑞貴 , 外山　志帆 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1462-1466

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＜point＞◆組織の凍結時のアーチファクト(氷晶形成)を防ぐには,組織を急速に凍結する.◆凍結には,熱伝導の良い包埋皿を用い,約-80℃に冷却された冷媒に浸漬することで氷晶形成を抑えることができる.◆凍結時に起こるブロックの変形を防ぐには,硬度がある包埋皿の使用や,専用器具による圧着,液体窒素を用いて凍結に伴いブロック内部に生じた圧(体積の増加)の逃げ道をつくる.

(1章)病理　凍結切片法　組織凍結　筋生検組織廣井　禎之 , 冨永　晋 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1467-1469

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＜point＞◆凍結切片法とは,組織凍結により薄切に適した硬さを与え,凍った状態のまま薄切切片を作製する方法である.◆筋生検組織は氷晶ができやすい組織であるため,液体窒素･イソペンタンによる急速凍結を基本とする.◆筋生検組織の凍結は,周囲を包埋剤で覆わずに行う.◆筋生検の病理診断には新鮮凍結切片が有用である.

(1章)病理　凍結切片法　薄切　外科病理組織(術中迅速病理診断) 青木　裕志 , 飯野　瑞貴 , 外山　志帆 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1470-1475

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＜point＞◆組織成分の種類により,薄切に適した温度が異なる.組織はさまざまな成分から構成されているため,得られた薄切切片(凍結切片)の状態から適切な温度を判断し,温度調節をしながら薄切を行う.◆薄切に適した温度は,リンパ節などは-10℃付近,脂肪組織は-30～-50℃である.温度が低すぎると切片にスダレ状の傷が生じ,高すぎるとシワが生じる.◆術中迅速病理診断の固定液は,アルコールを主剤とした固定液が用いられる.

(1章)病理　凍結切片法　薄切　筋生検組織廣井　禎之 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1476-1478

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＜point＞◆筋生検組織凍結の特徴は,周囲に支持すべき部位がないことである.◆筋生検組織凍結切片法では,アンチロールを使用した薄切を行う.◆クリオスタットの設定庫内温度は-20℃,薄切厚は10μmを基本とする.◆筋生検組織は,検体の取り扱いや染色に特殊な工程が多いが,染色は診断に不可欠である.

(1章)病理　凍結切片法　薄切　固定後凍結組織鈴木　美那子 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1479-1484

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＜point＞◆凍結保護剤が浸透された固定後の組織においても,氷晶形成を防ぐためには新鮮組織と同様に凍結溶剤での急速冷却を行う必要がある.◆固定後の凍結切片は,シワのない切片の作製が新鮮凍結組織よりも難しく,スライドガラスへの貼り付けにはいくつかの方法がある.◆薄切後の切片の保存方法は,染色用途によって区別する.

(1章)病理　電子顕微鏡矢野　哲也 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1485-1491

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＜point＞◆なるべく早く冷蔵庫(4℃)での固定を開始し,アーチファクトの少ない切り出しを心がける.◆脱水初期では,4℃で徐々にアルコール濃度を上昇させる.置換剤はQY-1が扱いやすい.サンプルの方向性が必要な場合,シリコン製の包埋板を使用する.◆ダイアモンドナイフの摩耗を極力避け,刃の親水性を保つ.グリッド(メッシュ)の親水化により,きれいな切片の回収効率が向上する.

(2章)細胞診(塗抹･固定)　総論澁木　康雄 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1494-1498

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＜point＞◆塗抹や固定は,スクリーニングや判定において大きな影響を与える因子の一つである.◆塗抹法にはいくつかの種類があり,検体の種類や性状に応じた方法を選択する.◆固定は塗抹後,素早く行うことが肝要である.

(2章)細胞診(塗抹･固定)　喀痰柿沼　廣邦 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1499-1503

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＜point＞◆喀痰は中枢側の悪性腫瘍や肺がん検診における検査として用いられる.◆喀痰は検体の性状により悪性細胞の含有率が異なるため,その確認は重要である.◆喀痰の塗抹は標本の見やすさや細胞診断に影響を及ぼすため,適正な量および範囲を心がけて標本を作製する必要がある.

(2章)細胞診(塗抹･固定)　液状検体澁木　康雄 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1504-1506

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＜point＞◆検体は採取後速やかに提出してもらい,ただちに処理するのが望ましい.◆血性検体は,溶血法や二重遠心法を行うことで有核細胞の回収率を高められる.◆引きガラス法による塗抹は,検体の性状から,引きガラスの角度と引く速度で調節を行う.◆固定は,湿固定も乾燥固定も素早く行うことが重要である.

(2章)細胞診(塗抹･固定)　FNA 鈴木　彩菜 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1507-1510

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＜point＞◆吸引物の性状や採取量にあわせて,合わせ法･圧挫法･吹き付け法のなかから塗抹方法を選択する.◆観察しやすい標本にするために,できる限り薄く,できる限り血液を除去して塗抹する.◆基本的には塗抹後ただちに固定すべきだが,液状検体の場合には,剥離防止のために塗抹後5～30秒間おいてから固定するとよい.

(2章)細胞診(塗抹･固定)　LBC 河原　明彦 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1511-1516

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＜point＞◆LBCは採取した細胞を固定してからスライドガラスに塗抹する細胞診処理法であり,標本作製の標準化,検体不適正率の減少や補助検査による診断精度の向上が期待できる技術である.◆LBCの標本作製法には,大別して自然沈降法とフィルター転写法の2つがある.◆LBCの保存液/固定液はおもに婦人科検体用と非婦人科検体用が準備されており,それぞれのLBC保存液/固定液の組成と成分は異なっている.◆検体の余分な血液成分を除去することにより,限局した範囲内に薄く塗抹された標本が実現する.

乳腺のセンチネルリンパ節とは河原　明彦 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1516

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(3章)がんゲノム　組織検体取り扱い(固定,薄切,伸展の技術) 柳田　絵美衣 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1518-1525

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＜point＞◆プレアナリシス段階,アナリシス段階の処理条件は,がんゲノム解析結果に影響を与える.◆がんゲノム検査に用いる検体では,コンタミネーションに細心の注意を払う.

NGSで何がわかるのか柳田　絵美衣 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1526

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(3章)がんゲノム　組織の取り扱いと組織保存金子　伸行 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1527-1531

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＜point＞◆検体採取にあたっての原則を決めておく.◆組織摘出後から急速凍結までの時間を短くする.◆コンタミネーションを起こさないようにする.◆採取時の手順,長期保管方法などを取り決めておく.

がんゲノムとは? 金子　伸行 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1532

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(3章)がんゲノム　血液検体処理森　こず恵 , 畑中　佳奈子 , 畑中　豊 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1533-1536

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＜point＞◆検査ごとに指定された検証済みの採血管を使用し,採血後はフィブリン析出を避けるため速やかに転倒混和する.◆血漿分離の際には,有核細胞の傷害やバフィーコートの混入がないように適切な手順,処理条件に沿って行う.◆正しい結果を得るために,その検査の特性を理解し,検体の取り扱い上の注意点に十分留意することが必要である.

"Germline"変異,CHIPって? 畑中　佳奈子 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1537

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がんゲノムを考慮したセルブロック作製の注意点加戸　伸明 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1538

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(4章)血液検査　末梢血塗抹標本の作製と固定･検体の保存日下　拓 , 太田川　和美 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1540-1543

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＜point＞◆適切な塗抹標本の作製が血球形態の観察において重要である.◆目的の染色方法に合った固定方法を選択する.◆末梢血塗抹標本の作製では時間経過とともに細胞崩壊や血球形態の変化が起こるため,採血後は速やかに塗抹標本を作製する必要がある.

(5章)尿沈渣　尿沈渣検査を目的とした検体処理土屋　貴絵 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1546-1549

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＜point＞◆尿は生理的変動の大きい検体であり,検査目的や患者病態に応じた採尿時間および採尿方法を遵守し,適切な検査を実施することが重要である.◆コンタミネーションを減らすための対策として,患者への採尿指導などを工夫する.◆尿中有形成分を概数計測する尿沈渣検査では,決められた尿量,沈渣量,スライドガラスへの積載量を厳守する.

(6章)寄生虫検査山本　徳栄 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1552-1557

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＜point＞◆臨床症状から推定される種と発育ステージにより,適切に検体を採取して最適な方法で検査を実施する.◆赤痢アメーバの栄養型は迅速に鏡検し,当日中にコーン染色をすることが望ましいが,染色が困難であれば,多数の写真と動画を撮影する.◆ホルマリンはDNAを断片化するので,遺伝子検査を行う検査材料には使用しない.◆ショ糖浮遊法では,浮遊するオーシストに焦点を合わせる技術の習得が重要である.

(7章)染色体検査松田　和之 50巻13号 , 2022年12月 , pp.1560-1564

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＜point＞◆染色体検査は,光学顕微鏡下で数メガ塩基レベル以上の変化を検査できる全ゲノム検査である.◆ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)標本やメイギムザ染色標本は,FISH検査に利用できる貴重な検査材料である.◆染色体レベルでの変化は,塩基レベルでは多大な変化になっている.◆遺伝子レベルのみならず,染色体レベルでの異常も意識して総合的に疾患を理解することが重要である.

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Medical Technology
50巻13号
(2022年12月発行)

電子版ISSN：印刷版ISSN：0389-1887 医歯薬出版

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特集　今日から役立つ　形態学的検査,がんゲノム検査の検体取り扱い

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