O-ClickFCを用いた脂質代謝動態の遺伝子スクリーニング

Genetic screening of lipid metabolism and dynamics by O-ClickFC

　細胞内で脂質は，複雑なタンパク質ネットワークによって代謝されながら，さまざまなオルガネラへと運ばれ，動的な分子集合体である細胞膜を形作る．脂質はゲノムに直接コードされない代謝物であり，その分析に労力・時間が伴う解析困難な研究標的である．そこで筆者らは，オルガネラ選択的な脂質の蛍光標識法とフローサイトメトリー（FC）を融合したO-ClickFCを開発し，細胞内脂質分布の量・空間情報をハイスループットに計測する新戦略を実現した．この技術をCRISPRスクリーニングへ適用し，ヒト細胞の主要なリン脂質ホスファチジルコリン（PC）の代謝動態に重要な遺伝子を網羅・同定できることを実証した．今回の探索から，既知の脂質関連酵素だけでなく，PC合成に必須なコリン輸送体FLVCR1や，PCの形質膜表出に重要なCDC50Aを発見した．将来的に，本技術を蛍光標識可能な他の生体分子に適用することで，その代謝動態の制御基盤の解明が期待される．