PCR法を用いた涙液からの単純ヘルペスウイルスDNAの検出感度

Detection sensitivity of herpes simplex virus DNA in tear fluid by PCR method

　単純ヘルペスウイルス（HSV）培養液の希釈系列を用いてPCR法によるHSV-DNAの検出感度をシルマー試験紙非使用と使用の両条件下で検索したところ，両者ともに10PFU／mlであった。本条件で対象眼（上皮型角膜ヘルペス3例3眼，ヘルペス性結膜炎2例3眼）と正常眼（10例10眼）の涙液中のHSV-DNAの有無を検索した結果，対象眼は全て陽性，正常眼は全て陰性であった。さらに陽性シグナルをイメージアナライザーで定量化することにより対象眼の涙液中のHSV濃度を推定できた。以上より，本条件でのPCR法は外眼部HSV感染症の補助診断に有用で，本方法で涙液中のHSV濃度の半定量化が可能と考えられた。

We evaluated the sensitivity of polymerase chain reaction, PCR, in detecting herpes simplex virus (HSV)-DNA in graded diluted culture solutions. The sensitivity was 10PFU/ml, independent of whether the tear fluid was obtained with or without Schirmer strips. We applied the method to 6 eyes of herpetic epithelial keratitis or conjunctivitis and to 10 normal eyes. HSV-DNA was detected in all the 6 herpetic eyes and in none of normal eyes. Additional use of image analyzer enabled quantitation of virus concentration in the tear fluid. The present PCR method, in which the sample is collected with Schirmer strips, is useful in diagnosing viral infections in the ocular surface and in estimating the virus concentration.