桐沢型ぶどう膜炎患者の前房水から検出された水痘帯状ヘルペスウイルスゲノムのPst I制限酵素による解析

Polymerase chain reaction and Pst I restriction endonuclease pattern for the detection of varicella-zoster virus genome in ocular samples from a patient with acute retinal necrosis

　65歳女性の片眼性桐沢型ぶどう膜炎の病因検索のためにpolymerase chain reaction法で患者の眼組織から水痘帯状ヘルペスウイルス（VZV）ゲノムの検出を試みた。プライマーはVZVに特異的な5’-TTCAGCCAACGTGCCAATAAA-3'と5'-GACGCGCTTAACGGAAGTAAC-3’を使用した。前房水からVZVゲノムを検出できたが，硝子体からはVZVゲノムは検出されなかった。

　日本で分離されたVZVゲノムの25％はPstⅠ制限酵素で切断されない点変異株（Pst I-site-less　mutation）であるという報告があり，また日本人桐沢型ぶどう膜炎からPst I-site-less mutationが検出されたとの報告があるため，株の同定を行った。陽性コントロールのVZVゲノムはPst I-site-less　mutationであるためPstⅠ制限酵素で切断されなかった。しかし，筆者らが検出したVZVゲノムはPst　I制限酵素で2断片に切断された。以上の結果から，筆者らが桐沢型ぶどう膜炎患者から検出したVZVゲノムはPst I制限酵素で切断される通常のVZV株であることが判明した。

We used the technique of DNA amplification with the polymerase chain reaction to detect the virus genome in ocular samples from a patient with clinically diagnosed acute retinal necrosis (ARN) . Using VZV primers, we detected the VZV genome in the aqueous humor, but not in the vitreous, from the patient, amplifying a DNA fragment 642 base pairs in length. After detection of the VZV genome, we used the Pst I restriction endonuclease for VZV strain differentiation because an epidemiological study found the Pst I -site-less mutation in 25% of the VZV strains seen in Japan. The VZV genome from the patient had a Pst I cleavage pattern, but positive control represented a VZV carried a Pst I -site-less mutation. From the present study the patient was thought to be caused by infection of VZV having a Pst I cleavage pattern.