DNA顕微螢光測定法

DNA cytofluorometry

　■　概要

　DNA顕微螢光測定法は，pg（1兆分の1g）のオーダーの物質を，螢光を利用し，in situで顕微測光によって定量する技術をDNAに応用するものである。この方法の開発の歴史をたどると二つの大きな意義があったことがわかる。その一つは，超微量の物質を光学的に正しく定量するために，どのような光学装置が必要であり，どのような螢光物質を用い，どのような条件で測定すればよいかというハードウエアとソフトウエアの知識が集ったことであって，この基礎の上に，Fura2のような螢光色素を用いる生細胞内Ca^＋＋分布のリアルタイムの定量^1）や，FITC標識dextranを用いる細胞内pHのモニタリング^2）のような技術が発展した。螢光プローブの種類によって，このような細胞内螢光定量法はこれからさまざまの細胞機能解析に応用されていくであろう。また，第二の意義は，"ニューロンのDNAが生後の経験の集積とともに増量していくという学説"に徹底的な吟味が行われ，脊椎動物の中枢神経系ではそのような増量はないという結論がえられた^3）ことである。このさい，成熟した脳の中でDNA合成を行うのは（間葉系細胞は別として）グリア細胞のみであることが同時に明らかになった。したがって，³H-thymidineのオートラジオグラフィを行うことができないヒトの脳においても，グリア系細胞の増殖をみる方法として用いられるようになっている。