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Brain and Nerve No to Shinkei Volume 47, Issue 9 （September 1995）

Brain and Nerve 脳と神経 47巻9号（1995年9月発行）

Japanese English

原著

レトロウイルスベクターシステムを用いて作成したL-DOPA産生初代線維芽細胞 L-DOPA-producing Primary Fibroblasts Genetically Modified with a Retrovirus Vector System 石田昭彦 ¹ , 六川二郎 ¹ Akihiko Ishida ¹ , Jiro Mukawa ¹ ¹琉球大学医学部脳神経外科学講座 ¹Department of Neurosurgery, University of the Ryukyus School of Medicine キーワード： Parkinson's disease , gene therapy , retrovirus vector , fibroblasts , tyrosine hydroxylase Keyword: Parkinson's disease , gene therapy , retrovirus vector , fibroblasts , tyrosine hydroxylase pp.887-892

発行日 1995年9月1日 Published Date 1995/9/1

DOI https://doi.org/10.11477/mf.1406900842

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Abstract 文献概要
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　〈目的〉パーキンソン病の新しい移植グラフトとして線維芽細胞に着目し，L-DOPA産生遺伝子導入線維芽細胞の作成を試み，脳内移植遺伝子治療法の可能性を探った。〈方法〉ラット初代皮膚線維芽細胞にレトロウイルスベクター（pDGL）を用いてチロシン水酸化酵素（TH）cDNAを加え（1），さらに外来サイトメガロウイルスプロモーター（CMV）を組み込んだ（2）。この2種類の遺伝子導入細胞に対して，免疫組織化学染色および生化学的定量を行った。〈結果〉（1），（2）ともにTHの発現を認めたが，（2）の方がL-DOPA合成能が高く，経時的に増大した。この傾向は細胞凍結期間・回数や継代数に関係なく維持された。遺伝子導入により形態学的変化は認められなかった。〈結論〉線維芽細胞は採取や培養が容易であること，レトロウイルスベクターを用いた遺伝子導入線維芽細胞は安定したL-DOPA合成能をもつことから，大量供給源となる可能性をもち，Parkinson病に対する脳内移植遺伝子治療の新たなグラフトとして有望である。

Although intracerebral grafting has become a new strategy for the treatment of Parkinson's dis-ease, many problems related to the grafts remain. We focused on primary skin fibroblasts as grafts.

Rat primary skin fibroblasts were transfected with a retrovirus vector containing the cDNA of human tyrosine hydroxylase (TH) (pLTHSNL) or cytomegalovirus promoter (pCTHSNL) as a for-eign promoter, and catecholamine production and release by these genetically modified fibroblasts, were analyzed in vitro immunocytochemically and by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection (HPLC-ECD).