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Brain and Nerve No to Shinkei Volume 21, Issue 4 （April 1969）

Brain and Nerve 脳と神経 21巻4号（1969年4月発行）

Japanese English

研究

有機水銀化合物の組織化学的表現法の検討 A HISTOCHEMICAL DETECTION OF THE ORGANIC MERCURY IN TISSUE:A MODIFIED TIMM'S SILVER SULFATE METHOD 岩崎祐三 ¹ , 生田房弘 ¹ Yuzo IWASAKI ¹ , Fusahiro IKUTA ¹ ¹新潟大学脳研究所神経病理 ¹Department of Neuropathology, Brain Research Institute, Niigata University pp.349-352

発行日 1969年4月1日 Published Date 1969/4/1

DOI https://doi.org/10.11477/mf.1406202527

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I．はじめに

　組織内に沈着した重金属の組織化学的証明法の一つにTimm （1958）により発表された硫化銀法がある^4）。この方法により，ヒトや実験動物の有機水銀中毒の際にも，それらの中枢神経や肝，腎などに有機水銀中毒例に特異的と考えられる多量の黒色顆粒が検出されることが報告されている^3）4）。

　Timmの方法は，硫化水業を組織に作用させることにより，組織中の重金属をまず重金属硫化物となし，ついでそれら重金属硫化物に銀を結合させることにより，可視の顆粒とすることを前提としているため，最終的に検出される銀化合物よりなるであろう顆粒の特異性についての疑問と，厳密には顆粒が問題とする重金属そのものでないであろうことに問題がある。しかし，この方法がきわめて鋭敏な方法であることや，検出される顆粒が安定な銀粒子からなる点，さらに，組織内に異常に蓄積されている重金属の種類は他の化学的測定法でも，また，対照群と比較しつつ検索をすすめることによつても除外あるいは決定しうることなどから，この方法はやはり重金属中毒の病理発生解明にとつて，少なくとも現在，きわめて有用な手段の一つとみなさねばならない。

Timm's silver sulfate method for histochemical detection of the heavy metals in tissue was partially modified and successfully applied to the light and electron microscopic histochemical study of human and experimental organic mercury intoxication.

For the light microscopic examination, sections from the tissue slice pretreated with H2S-saturated 95% alcohol were incubated in the developer in the "dark room " and the excess of the reagent was washed out before exposure to light. The H2S-alcohol and the developer were prepared by the method previously modified by Oyake et al but gum arabic was not added to the developer. By the in-cubation in the " dark room ", unfavorite brown discoloration of the back ground substance was avoided. Consequently, the prolongation of the reac-tion time became possible in cases where the detec-tion of the heavy metal was difficult. Elimination of the gum arabic from the original developer re-duced the contamination of the slide without any significant change in the distribution of the granules in the tissue (Compare Fig. A-C with Fig. D).

For the electron microscopic study, a 50μ frozen section was immersed in the developer for the ade-quate time and then exposed to light before embed-ding in the epoxy resin. A 1μ section stained with toluidine blue demonstrated fine granules (Fig. E) correspond to ones in paraffin embedded specimens (Fig. A-D). The granules were observed on the ultrathin section by electron microscope (Fig. F).