固定—その実際面

固定剤の選択

　今回は固定の実際面について述べよう。

　はじめに固定液の選択についてのべる。染色対象すなわち脂質・糖質・酵素などにより固定剤を変えなくてはならない。脂質に対しては，アルコール，エーテルなど脂溶性固定剤は用いられない。ふつう，ホルマリンが用いられる。オスミウム酸も有力な脂質固定剤で，ことに微細な脂質粒子まで固定染色するので，電子顕微鏡レベルでの脂質証明にも用いられる。糖質は水溶性であるので，ホルマリンは用いられない。アルコール，アセトンなどが用いられ，包埋もパラフィン包埋でなく，ツェロイジン包埋する。糖タンパク質など複合多糖類の場合は，結合しているタンパクが固定されるので，一応どの固定剤でもよい。種々の酵素類の組織化学的証明を行なう際には，固定剤の選択とともに，組織材料切除後，非常にすみやかに（10分以内ぐらい）低温固定する必要がある。人体の諸酵素は，胃中のペプシンを除き，中性または弱アルカリ性で作用し，酸性メジウムには非常に弱く，酵素作用停止，または破壊されてしまう。したがって，アルコール，アセトン，エーテルなどの中性固定剤が用いられる。また酵素反応は嫌気性であるから，組織材料を採取してから，時間が経つとどんどん酵素反応は進行してしまい，せっかく染色しようとする時には，すでに目的とする酵素はなくなってしまうこともある。