椎間板細胞を用いたWntシグナルによるCCN2の機能解析

CCN family member 2/connective tissue growth factor（CCN2/CTGF）is regulated by Wnt-beta-catenin signaling in nucleus pulposus cells

【要　旨】

　目　的：椎間板におけるWntシグナルとCCN2のシグナルメカニズムは不明であり，変性過程の関与が示唆される．本研究ではWntシグナルによるCCN family member 2/connective tissue growth factor（CCN2/CTGF）の分子学的解析を目的とした．

　対象および方法：Sprague-Dawleyラット（n＝32，11週齢）から採取した椎間板組織や細胞を用い実験を行った．まず組織中のCCN2発現を調査した．その後WntシグナルによるCCN2の転写活性を測定した．またWntシグナルによるCCN2発現にMAPKシグナルが関与するか調査するため，MAPKのインヒビターを添加しCCN2の転写活性や遺伝子，蛋白発現について解析した．

　結　果：髄核や線維輪細胞ともにCCN2の遺伝子が高発現していた．Wntの活性化はCCN2転写活性を有意に減少させた．逆にWntの抑制はCCN2転写活性を上昇させた．CCN2転写活性の減少はMAPKインヒビターの添加によってさらに抑制された．この結果は，遺伝子や蛋白解析でも同様な結果であった．

　結　論：本研究から髄核細胞ではWntシグナルがMAPKシグナルを介し，CCN2発現を調節していることが明らかになった．WntシグナルとCCN2との発現調整にMAPKシグナルが関与していたことから，椎間板変性に対する治療標的になる可能性が示唆された．