cleaved caspase 3 免疫染色―優れた組織化学的アポトーシス検出法

はじめに

　アポトーシスの組織化学的証明法として，ヌクレオソーム単位のDNA断片化を検出するterminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labeling(TUNEL)法，in situ nick translation法や単鎖DNA免疫染色が広く利用されてきた．しかし，これらの証明法は，固定を含めた標本作製過程や標本採取時の影響により偽陽性・偽陰性反応を生じやすいだけでなく，再現性を高めるための前処理(増感法)を含めた技術論にも不安定な側面を有している^1，2）．

　近年，アポトーシス誘導因子，実行因子の同定とシグナル伝達経路の解析が盛んに行われ，アポトーシスにおいて生じる生化学的・形態学的変化の多くは，システインプロテアーゼの一種であるcaspasesによる特定蛋白質の限定分解に依存することが解明された．なかでもcaspase3はアポトーシス実行過程における中心的酵素であり，活性化されたcaspase3(cleaved caspase3，c-caspase3)を検出することで，組織・細胞内のアポトーシスをDNA断片化よりも早い段階から捉えることができる．加えてc-caspase3免疫染色は技術的に安定しており，感度および再現性に優れた組織化学的アポトーシス検出法である^1，2）．

　癌治療においてもアポトーシスは抗腫瘍効果発現に重要な役割を担っており，化学療法および放射線療法はアポトーシス誘導因子として理解されている．したがって，本稿では化学療法・放射線療法によって誘導されるアポトーシス経路におけるc-caspase3の位置づけについて概説する．次いで，癌臨床に連携した免疫組織化学の視点から治療の効果判定，治療効果・患者予後の予測におけるc-caspase3検出の意義について言及する．