耐熱性アルカリホスファターゼ

　アルカリホスファターゼ（ALP）は臓器特異性のある酵素であり，各組織のALPは電気泳動の移動度，免疫沈降性，基質親和性，その他の物理化学的方法（熱安定性，阻害剤，変性剤など）によりそれぞれ区別可能である．これらの鑑別方法を組み合わせて，ヒト血清中に肝性，骨性，小腸性，胎盤性などのALPアイソエンザイムが同定される^1〜8）（表1）．

　本技術解説で問題とするのは，胎盤ALPとそのvariantと考えられる耐熱性を有する酵素群である．胎盤性ALPの著しい熱安定性は特異なもので，co-factorのMg^2＋の存在下では，65〜70℃30分間程度の熱処理でほとんど失活されず，構造の変化も起こらない^9）．そこで，一般に65℃5〜10分間^10〜14）の高熱処理が使われており，これにより他のALP群を完全に失活除去して胎盤ALPとそのvariantを特異的に分別できる（表1）．ただし，熱試験にはこのほか56℃5〜15分間の比較的低温の加熱法があり，残存するALPを同様に耐熱性ALP（heat-stable ALP）と言うことがあるから注意が必要である．この方法は骨性ALPの鑑別に用いるもので，肝性ALPとの鑑別が電気泳動上困難な場合，ほかに有効な手段がないため現在でも広く使われている^7）．