尿中ホモゲンチジン酸の測定法

Determination of urinary homogentisic acid by thin-layer and liquid chromatography with electrochcmical detection (TLC-LCEC).

はじめに

　アルカプトン尿症は肝におけるホモゲンチジン酸酸化酵素の遺伝的欠損^1）で，まれな疾患ではあるが，黒変する尿やオクロノーシスを伴う関節症など，特徴的な臨床像により古くから知られている^2〜6）．更に近年はコラゲン代謝の面からも新たな注目を浴びている^7）．

　確定診断のためには，尿中のホモゲンチジン酸（ho-mogentisic acid；HGA）を同定・定量することが必要となる．従来の測定法はHGAの還元性を利用したもので，簡単ではあるが非特異的なものが多い^8〜11）．同定にはHGAの酸化反応生成物の吸収波長を測定する方法もあるが^12），クロマトグラフ法が優れている．この場合，濾紙法^13,14）より薄層法（TLC）^15）が検出感度が鋭く，展開所要時間も短い．定量法としては酵素法^16）が最も優れているが，薄層で分離し，溶出・純化した試料を測定するのが実際的で，最近では電気化学的検出法を用いた高速液体クロマトグラフィー（liquid chromatography with clectro-chemical dctection；LCEC）も応用されている^17）．