HRPを用いる線維連絡の研究法

Application of HRP for the investigation of neuronal connection

　horseradish peroxidase（HRP）の神経終末や神経細胞内への取込みおよびその逆行性軸索輸送，順行性軸索輸送を利用した神経線維連絡の研究については，Kristensenら（1971）^12,13）が骨格筋や舌などにHRPを注入し脊髄運動ニューロン，延髄舌下神経核のニューロンにおいて，筋終板付近から取り込まれたHRPが逆行性軸索輸送により運ばれ，それらのニューロンの核周部に存在することを証明して以来，末梢神経系のみならず中枢神経系においても，膨大な研究発表がこの10年間に行なわれている^16）。このHRP利用による線維連絡の研究は従来から行なわれていた中枢神経系の一定領城を脳定位手術的に電気凝固などにより破壊し，ニューロンの核周部の変性に伴なう順行性軸索変性を経た終末変性を変性終末鍍銀法や電顕により観察することにより，線維連絡を追求する方法や，アミノ酸の同位元素を一定領域に投与した後，その軸索輸送をオートラジオグラフにより調べることによる線維連絡研究法に取って代わるぐらいによく用いられている。しかし，HRPの取込み機構は，軸索輸送の標識に用いられる色素などの蛋白についても同様であるが，現在なお詳細にはわかっていない。

Abstract

　Horseradish peroxidase (HRP) has been used as a useful tool for investigation of neuronal connections in CNS and periphery nervous system. However there are several critical factors in this method such as injection and transport valuables of HRP, fixation valuable of tissue incubation valuable in reactive solution and visibility valuable. There are also different substrates (chromogen) such a DAB, BDHC and TMB for enzymehisto-chemistry of HRP by which transported HRP through axoplasmic flow can be detected as precipitation of oxidized chromogen.