雑誌文献を検索します。書籍を検索する際には「書籍検索」を選択してください。

Rinsho Kensa Volume 64, Issue 10 （October 2020）

臨床検査 64巻10号（2020年10月発行）

Japanese English

増刊号がんゲノム医療用語事典

4.検査（検体処理，標本作製：病理検査）に関する用語井上博文 ^1,2 ¹岡山大学病院病理診断科・病理部，医療技術部 ²岡山大学大学院医歯薬学総合研究科臨床遺伝子医療学キーワード： DNA断片化 , 架橋 , UNG処理 , 10％中性緩衝ホルマリン , 腫瘍細胞含有率 , レーザーマイクロダイセクション , LMD , トリミング , プレアナリシス段階（固定） , アナリシス段階（固定） Keyword: DNA断片化 , 架橋 , UNG処理 , 10％中性緩衝ホルマリン , 腫瘍細胞含有率 , レーザーマイクロダイセクション , LMD , トリミング , プレアナリシス段階（固定） , アナリシス段階（固定） pp.1123-1132

発行日 2020年10月15日 Published Date 2020/10/15

DOI https://doi.org/10.11477/mf.1542202480

PDF(879KB)

有料閲覧

閲覧方法のご案内

この論文を閲覧するためにはログインが必要になります。

パスワードを忘れた場合新しくユーザー登録する施設共通IDをご利用の方はこちらから

PPV購入案内

1,320円 (1,200円+税10%) こちらは、1123ページから1132ページの文献です。

PPV（ペイ・パー・ビュー）とは、論文（記事）単位で購入・閲覧ができるサービスです。
購入には医書.jp本会員登録が必要です。

新規会員登録はこちらから

会員登録完了後に改めて上記「購入サイトへ」を選択してください。
または「購入サイトへ」選択後に「購入ログイン」、「新規会員登録」の順に進んでください。

会員登録について詳しくは

こちら

をご確認ください。

Abstract 文献概要
1ページ目 Look Inside
参考文献 Reference

DNA断片化

　がんゲノム遺伝子パネル検査とは，がん細胞暴走の原因となる遺伝子領域（エクソン）を解析（シーケンス）することで原因となる遺伝子（ドライバー遺伝子）を見つけ出す検査である．解析する核酸（DNA）は次世代シーケンサーによって施行されるが，その方法は抽出された核酸（DNA）を一定塩基数（150〜300bp）の長さに調整（ライブラリー作製）後にターゲットを限定し，シーケンスする．ライブラリーを作製するためには元のDNA塩基数が一定程度の長さが必要である．短すぎるとシーケンスに必要なライブラリー濃度を得ることができず，シーケンスを開始することができない．DNA断片化は恒常的に発生しているが，検体採取後の操作や保管，取り扱いによって断片化が亢進する．使用する検体によって取り扱う者の配慮が必要となる．外的断片化の要因となるものに熱，紫外線，酵素，化学物質（ホルマリン，キシレンなど），時間などがある（図1）．

　がんゲノム遺伝子パネル検査では主に，病理検査で過去に使用したホルマリン固定パラフィン包埋（formalin-fixed paraffin-embedded：FFPE）ブロックを用いる．FFPEブロックは組織形態保存性において優れた試料であるが，作製工程において先に記したDNA断片化の因子を全て含む試料でもある．切離後の固定までの冷虚血時間（切除から固定開始までの時間）や，FFPEブロック作製後の保管期間などの時間的要因，保管中・搬送時に曝される可能性のある紫外線などの光の要因である．特に化学物質による影響は大きく，固定工程で使用するホルムアルデヒドは核酸と蛋白質のアミノ基間でmethylene架橋形成する．この架橋構造は固定時間が長くなればその密度が増加する．架橋構造が形成されるだけでDNA断片化の発生はなく，核酸抽出工程やライブラリー作製工程における加熱処理によって架橋構造付近で核酸が離断される．