脳組織の脂質測定法—I．リン脂質

抽出と水洗

1．抽出

　脳組織1gに20mlの割合でクロロホルムメタノール（C-M, 2容：1容）を加え，硝子ホモジェナイザーでホモジェナイズした後，遠心して上清を遠心管にとり，沈渣はもう一度C-M （2：1）で抽出して1回目の上清を入れた遠心管に加える。室温におけるこの操作で通常のリン脂質はほとんど抽出される。

　【注意】組織量に対してC-M量が少ないと遠心しても組織が完全に沈澱しないか，上清が濁つているから，このような場合はC-M量を増せばよい。代謝実験の場合，反応をとめるため一般に3塩化酢酸が用いられるが，脂質を抽出する場合は用いないほうがよい。3塩化酢酸の使用により，脂質の変化（褐色になる，とくにプラスマローゲンが分解しやすい），蛋白質が非極性となつてC-Mに溶けやすくなる，C-Mだけでは抽出されない脂質（protein-bound inositide）も抽出されることなどがおこるためである。したがつて反応をとめるためには冷メタノールまたはアセトンを加え，濾過後，濾紙上の切片（ホモジェネイトの場合は遠心した沈査）をホモジェナイザーに入れて抽出するのがよい。大量の組織から抽出する場合は，あらかじめアセトンで処理するか（水，中性脂肪およびコレステロールの大部分が除かれる），1回目の抽出はC-M （1：1）にすることによつて抽出に使うC-M量を少なくすることができる。