螢光偏光法によるリンパ球活性化の測定法

　細胞性免疫能を把握する方法の一つにリンパ球幼若化反応がある．この方法はヒトの末梢血リンパ球にPhytohemoagglutininやConcanavalinAなどの分裂素を加えて刺激し，リンパ球を分裂増殖させ，DNA合成期に入ったリンパ球にH-Thymidineを取り込ませ，放射活性を測定し，リンパ球幼若化の程度を測定する．しかしこの方法は次のごとき短所を有する．①48時間から72時間の培養が必要である．②放射性同位元素を用いるので特別の設備が必要である．③培養を行うため無菌操作が必要である．④人工的な培養液，特にウシ胎児血清を使用する場合には，非特異的なリンパ球の幼若化現象がみられる．したがって，リンパ球の幼若化を早く，正確に把握できる方法が必要である．リンパ球の幼若化現象の一連の過程の中で，最初のリンパ球活性化に着目し，従来のリンパ球の幼若化現象の代わりに使用する試みが行われた．リンパ球に刺激素を加えると，リンパ球細胞膜の流動性が変化し，キャップフォーメーションを起こすことが報告されている．このリンパ球細胞膜の流動性の変化は，³H-thymidineの取り込みでみると，リンパ球幼若化反応とよく相関し，これはリンパ球幼若化反応の最初の反応と推定される．リンパ球の細胞膜をDPHという螢光色素で標識し，螢光偏光法にて，螢光偏光度を求め，間接的にリンパ球の膜の流動性を測定する．