キャピラリー電気泳動法による変形β2-ミクログロブリンの検出

Detection of intermediate β2-microglobulin in serum with capillary electrophoresis

1 . はじめに

　透析テクノロジーの進歩は20年以上の長期生存と80歳以上の高齢透析を可能としたが，その一方で10万人以上の透析要介護者を抱える新たな社会問題を生み出した．要介護者そう出のほとんどは長期透析症候群と呼ばれる合併症が原因となっており，その最も象徴的かつ重篤な病態が透析アミロイドーシス(dialysis-related amyloidosis；DRA)である．DRAは分子量11,800の低分子蛋白であるβ₂-ミクログロブリン(β₂-m)を原因蛋白(前駆物質)とするアミロイドーシスである．β₂-mは8個のストランド(分子連鎖)とそれぞれのストランドをつなぐループペプタイドが折り畳まれて(folding)，全体として球状になっているが，内部は2つのβシート構造からなり，立体構造的に高いアミロイド原性を有している．アミロイドーシスには原因となる固有のアミロイド前駆蛋白があり，正常な立体構造(native)を失い，misfoldingにより立体構造が変化することで発症すると考えられる．

　β₂-mについては，in vitroでは酸性処理や分断化により立体構造がほぐれてunfoldingし，アミロイド線維形成に至るmisfoldingが確認されている．1997年，Stoppiniら^1）は正常では分子表面に露出していないβ₂-m-C末端92-99位のペプタイドに対するモノクローナル抗体を用いて，in vitroでβ₂-mアミロイド化を抑制することを報告した．さらに2005年，共著者のMotomiya，Andoら^2）は透析患者のアミロイド組織が抗C末端モノクローナル抗体で染色されることを報告し，生体のアミロイド組織中のβ₂-mには正常な立体構造を失い，C-末端が分子表面に露出したunfolded β₂-mが存在することを証明した．また，いまだアミロイド化していない組織でも一部抗C末端抗体で染色されることから，β₂-mアミロイド化の前段階としてC-末端のunfoldimgが起こることを明らかにした．

　一方，Bellottiら^3）は透析患者のアミロイド組織から分離されたβ₂-mの一部が正常な立体構造に回復(refolding)することを確認した．これらの事実は生体内でnative β₂-mがアミロイドβ₂-m化する移行過程にはnative β₂-mに戻りうるreversibleなunfolded β₂-mが存在することを示唆している．2000年にはHeegaardら^4），次いでChitiら^5），De Lorenziら^6）が相次いでフリーゾーンキャピラリー電気泳動法(capillary electrophoresis；CE)を用いて，精製したβ₂-mをnative β₂-m(major component)とアミロイド原性を有するnon-native β₂-m(minor component)に分離できることを報告し，さらに溶液中で両者は動的平衡状態にあり，CEで分離されるnon-native β₂-mは部分的に立体構造がunfoldしたアミロイド化β₂-mへの移行過程上の中間体(intermediate β₂-m；Ⅰ-β₂-m)であることを明らかにした．

　最近，筆者ら^7）はCEにより血清中β₂-mをnative β₂-mとⅠ-β₂-mに精度よく分析できる方法を開発し透析患者についての知見を得た．本稿ではCEによる血清中変形β₂-m(Ⅰ-β₂-m)について紹介する．