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Rinsho Ganka Volume 75, Issue 4 （April 2021）

臨床眼科 75巻4号（2021年4月発行）

Japanese English

臨床報告

アデノウイルス角結膜炎迅速診断キットの検出感度の比較検討 Assessment of rapid diagnostic kit for detecting human adenovirus causing epidemic keratoconjunctivitis 橋爪芽衣 ¹ , 青木功喜 ^1,2,3 , 八幡信代 ⁴ , Gabriel Gonzalez ⁵ , 石田晋 ² , 大野重昭 ^2,3 , 佐藤精一 ¹ , 高岡晃教 ¹ , 北市伸義 ^2,3 Mei Hashizume ¹ , Koki Aoki ^1,2,3 , Nobuyo Yawata ⁴ , Gabriel Gonzalez ⁵ , Susumu Ishida ² , Shigeaki Ohno ^2,3 , Seiichi Sato ¹ , Akinori Takaoka ¹ , Nobuyoshi Kitaichi ^2,3 ¹北海道大学遺伝子病制御研究所分子生体防御分野 ²北海道医療大学眼科学系 ³北海道大学医学部眼科学教室 ⁴九州大学大学院医学研究院眼科学分野 ⁵アイルランドウイルス研究所 ¹Division of Signaling in Cancer and Immunology, Institute for Genetic Medicine, Hokkaido University ²Department of Ophthalmology, Faculty of Medicine and Graduate School of Medicine, Hokkaido University ³Department of Ophthalmology, Health Sciences University of Hokkaido ⁴Department of Ophthalmology, Kyushu University ⁵Clinical Bioinformatics National Virus Reference Laboratory-UCD Dublin, Ireland pp.442-447

発行日 2021年4月15日 Published Date 2021/4/15

DOI https://doi.org/10.11477/mf.1410213955

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要約　目的：現在，ヒトアデノウイルス（HAdV）を検出する迅速診断キットが臨床現場で使用されているが，各キットやウイルス型による感度の違いは明らかではない。近年では，新型ウイルスによる流行性角結膜炎（EKC）も流行し，これらに対する各キットの評価も必要である。今回筆者らは，EKCの原因となるウイルス型に対する各キットの検出感度をin vitroで比較検討した。

方法：EKCの原因となるD種8，37，53，54，56，64型と，咽頭結膜熱（PCF）の原因となるB種3型のウイルスDNAコピー数による段階希釈液を作製し，わが国で広く使用されている3種類のキット（A，B，C），および米国のキット（D）の型別検出限界を検討した。さらに，各ウイルス型液でウイルスDNAコピー数あたりのウイルス蛋白濃度を測定してウイルス型間で比較検討した。

結果：検出感度はキット間で異なり，C，B，D，Aの順で高かった。新型の53，54，56型は他の型と比較していずれのキットでも高感度で検出された。これらの新型ウイルスでは，ウイルスDNAコピー数あたりのウイルス蛋白濃度が他の型より10倍以上と有意に高かった。しかし，8型はウイルス蛋白濃度が他の型の1/5以下であるにもかかわらず，検出感度は他の従来型ウイルス型とほぼ同等であった。

結論：ウイルス検出感度はキットにより，またウイルス型により異なる。ウイルス型による検出感度の差は，ウイルスDNAコピー数あたりの蛋白濃度の違い，および抗体との親和性の違いによって生じると考えられた。

Abstract　Aim：Ocular adenovirus infections commonly present clinically with epidemic keratoconjunctivitis（EKC）and pharyngoconjunctival fever（PCF）. Their clinical diagnosis is routinely made with immunochromatography（IC）kits, variable accuracy. In this study, the sensitivity of 4 commercial kits against 7 types of human adenoviuses（HAdV）was evaluated in vitro.

Methods：HAdV responsible for EKC（types of 8, 37, 53, 54, 56, and 64）and PCF（type 3）were enrolled. Viral solutions were prepared by the serial dilution method and were injected into 4 different commercial kits；3 Japanese brands（A, B and C）and an American kit（D）. The minimum detectable quantity was evaluated in consideration of viral DNA copy numbers and their protein levels.

Results：The highest detection sensitivity was shown by kit C followed by kits B, D, and A. New types of HAdV-53, 54, and 56 were detectable in low concentration compared to other types by using the IC kit. Significantly higher viral protein levels were found in the solutions of these 3 types of HAdV than in those of others. HAdV 8 was detectable with low concentration of viral protein.

Conclusions：Detection sensitivity limits were different for HAdV and kits. Sensitivities of adenoviral rapid diagnosis tests may be antibodies maybe determined by viral protein level per DNA unit and affinity for HAdV.