免疫組織化学における発色法

はじめに

　免疫組織化学の発展については，1962年Barkaら^1），あるいはNakaneら^2）によって抗体に西洋ワサビ（horseradish peroxidase：HRP）や，酸性ホスファターゼを標識し，その発色を利用した酵素組織化学が開発されたことによって大きな発展の基礎が作られた．酵素抗体法には，これ以来，多くの新しい方法が開発され利用されてきた．ABC法，PAP法，間接法などはこの酵素組織化学の代表的な方法である．いずれの方法も，目に見えない抗原と抗体との反応により起こる反応産物を顕微鏡下で観察することを可能とするものである．これらの反応産物を可視化するためには，発色基質を用い，それを酵素の作用で発色させることが必要である．標識された酵素と使用する基質との組み合わせで種々の呈色が可能となる．また，これらの組み合わせによっては二重染色^3），4），三重染色^5）という形で異なる抗原を同一切片上に同定することも可能である．

　今回は，この呈色法（発色法）について実際的な観点から述べる．発色の原理については他書を参考されたい．