顕微蛍光測光装置による単一細胞内カルシウム測定の検討

　顕微蛍光測光装置を改良して，細胞内カルシウム量の定量を検討した．細胞内カルシウムの測定は細胞群によって測定されていたが，最近単一細胞での測定が，アメリカ，ヨーロッパ，そして現在日本でも盛んに行われるようになってきた．今回，個々の細胞のカルシウム量を蛍光色素FURA−2で染色し測定した．FURA−2は細胞内カルシウム濃度測定のための蛍光試薬としてR．Y．Tsienによって1985年に発表されたものである．カルシウムと結合したFURA−2の励起光は340 nm〜380nmに対し約500 nmにピークをもつ蛍光を発する．現在，カルシウム濃度は励起光340nm／380mmの蛍光強度比とカルシウム濃度の関係を示すキャリブレーションカーブ（相関グラフ）を用いて算出されている（図1）．この方法を基礎にして測定した．