PCRを用いたp53遺伝子のcodon 72部位におけるポリモルフィズムの検索と脳腫瘍への応用

Detection of Codon 72 Polymorphism of p53 Gene from Blood and Loss of Heterozygosity in Brain Tumor Using Polymerase Chain Reaction

　p53遺伝子は第17染色体短碗に存在する癌抑制遺伝子であり，exon 4内codon 72部位にポリモルフィズム（アルギニンCGC→プロリンCCC）をもつことが知られている。本研究では最近開発された微量の材料で放射性同位元素を用いず短時間での同定が可能であるヘテロ接合性に注目した簡便な方法を用い，日本人100例（ボランティア68例，脳腫瘍患者32例）におけるp53遺伝子のcodon 72部位のポリモルフィズムと2つの対立遺伝子のヘテロ接合性の出現頻度および脳腫瘍におけるp53遺伝子の欠落について検討した。本邦におけるヘテロ接合性の出現頻度は，約43％であり，アルギニン型，プロリン型はそれぞれ42％，15％であった。また，脳腫瘍においてLoss of heterozygosity（LOH）は，15例中6例（40％）であり，すべての腫瘍にはみられなかった。この方法は，ヘテロ接合性を示す約43％のヒトに対し，癌抑制遺伝子に発生する突然変異や欠落を容易に発見でき，腫瘍の発生および進展の検索に重大要な意味をもつものと思われた。

p53 gene which is known as a tumor suppresser gene locates in chromosome 17p and has a polymor-phism at codon 72 (Arginine CGC → Proline CCC).

In this study, we examined the frequency of polymorphism and of heterozygosity in Japanese, and the loss of p53 gene in brain tumor tissues of the patients with heterozygosity using a novel method.

The frequencies of heterozygosity, arginine type, proline type were 43 %, 42 % and 15 %, respectively. Heterozygosity was observed in 15 out of 32 patients with brain tumors and loss of hetero-zygosity (LOH) in these 15 cases was demonstrated in 40 %.

Although we are not certain whether LOH of p53 region is inevitable process of oncogenesis of some brain tumors, some false negative results may occur.

This quick technique requires small amount of samples and no radioactive isotope, therefore, can be applied to detect mutation and LOH occured in p53 region in terms of the genesis and progression of human neoplasms.