ヒトアストロサイトーマ細胞株および悪性グリオーマ組織中に発現されるサイトカイン遺伝子の検討

Expression of Cytokine Genes within Astrocytoma Cell Lines and Brain Specimens

　ヒトアストロサイトーマ細胞株5種とニューロブラストーマ細胞株1種とを用いてサイトカイン遺伝子発現の有無をPolymerase Chain Reaction（PCR）を用いて検討した。細胞より抽出したRNAより一本鎖cDNAを合成し，サイトカイン（TNF—α，—β，IFN—γ，G-CSF，GM-CSF）プライマーを用いてPCR増幅し，mRNA転写物の存在を調べた結果，非刺激もしくはIL−1βの刺激で全ての細胞よりTNF—α遺伝子の発現が認められた。また，非刺激状態ではTNF—αを発現していなかったアストロサイトーマ細胞で，IFN—γ遺伝子の発現が認められた。次いで、全ての細胞でGM-CSF mRNAが検知し得た。G-CSFについては2種のアストロサイトーマで陽性であった。さらにIL−1β存在下で，全ての細胞より遺伝子を発現し得ることが明らかであった。さらに，実際にグリオーマ切除標本を用いてこれらサイトカイン遺伝子発現の有無を検討した。グリオーマおよび，周囲の反応性グリア組織で種々のサイトカインが発現されていることが明らかであった。一方，対照として用いた正常脳からは，これらサイトカインは全く認められなかったことより，アストロサイト由来のサイトカインが脳内病変で，多彩なネットワークを形成していることが示唆された。

Expression of the Cytokine genes in human astroglial cell lineage was studied. Primers for 5 different human cytokine, TNF-α, -β, IFN-γ, G-CSF and GM-CSF, were used to analyze messanger RNA transcripts in 5 cultured human astrocytoma, one neuroblastoma cell lines and fresh brain specimens by polymerase chain reaction (PCR). Three out of 5 unstimulated astrocytomas, U138, U251, U373 MG and IMR32 neurob-lastoma cells expressed TNF-a genes. After stimulation with IL-1β (1000 U/ml) all these cell lines expressed TNF-a genes. TNF-β genes could not be detected in these cell lines even in the presence of any cytokine stimuli. We were able to detect expression of IFN-γ genes within 2 astrocytoma cell lines (U87MG and A172), which interestingly did not show TNF-α activ-ity. Constitutive expression of mRNA transcripts of GM -CSF could be detected in all astrocytoma and two out of 5 unstimulated astrocytomas, U87MG and U138MG, expressed G-CSF genes. After stimulation with IL-1β, all cell lines expressed G-CSF.