ラット実験脳腫瘍に対する養子免疫療法：LAK細胞の誘導およびその生物学的特性について

ADOPTIVE IMMUNOTHERAPY FOR THE EXPERIMENTAL BRAIN TUMOR IN RATS:INDUCTION OF LAK CELLS AND THEIR BIOLOGICAL CHARACTERISTIC

　抄録　Interleukin 2（IL−2）で誘導されるIymphokine activated killer （LAK）細胞は高い殺細胞能を有し，adoptive immunotherapyという観点から注目されている。我々は，ラット実験脳腫瘍に対するimmune transferの検討を目的に，ラット脾細胞よりLAK細胞を誘導し，その生物学的特性を中心に検討を加えた。IL−2はWistar系ラットの脾細胞1×10⁶／mlにCon A 5μg／mlを加え48時間培養した上清を用いた。LAK細胞は，Fischer系ラットの脾細胞4×10⁶／mlにIL−2を等容加えて誘導した。Fischer系ラットのsyngeneic tumorであるT9を標的として，4時間の⁵¹Cr release assay法を用いLAK活性の推移を検討した結果，培養2〜3日で最大の殺細胞効果が認められた。その他に，RSV induced braintumor, allogenic tumorであるKMT−17, xenogenic tumorであるYAC−1, K562, Raji cell, G361に対しても殺細胞効果が認められたが，正常脳細胞に対しては認められなかった。LAK細胞のphenotypeをcell depletion test, dye exclusion test, immunofluorescence法で検討した結果，一部はW3／13（panT），OX4（Ia） positiveの細胞群に属すpolyclonalな細胞集団であると考えられた。又，LAK前駆細胞はW3／13（—），W3／25（—），OX4（—），OX8（—）と考えられた。以上の結果を踏まえ，ラット脳腫瘍モデルに対するLAK細胞の，より有効な投与法に関して検討中である。

We have investigated the biological characte-ristic of Lymphokine Activated Killer (LAK) cells induced from spleen cells (SPC) of Fischer rats.

Supernatant of 48 hour culture medium (RPMI-1640, 10% FBS, 2-ME : 5 × 10^-5 M, HEPES : 10 mM) of SPC (1 x 10⁶/ml) from Wistar rats in the presence of Con A (5 p.g/ml) was used as Inter-leukin 2 (IL-2). LAK cells were generated by co-cultivation of SPC (4 x 10⁶/ml) from Fischer rats with peak reactivity on the 2 nd or 3 rd day of culture. Lytic activity was observed aginst not only syngeneic tumor cells (T₉, RSV induced braintumor), but also allogenic (KMT-17) and xenogenic (K 562, Raj i cell, G 361, YAC-1) tumor cells, while no lytic activity was observed against normal brain cells. Cell depletion test, dye exclution test and immunofluorescence method using monoclonal Antibodies (mAbs) revealed that LAK cells partially belonged to the population of activated T cell group (W 3/13, OX 4 positive) but the precursor cells did not react with any mAbs used (W 3/13, W 3/25, OX 4, OX 8).

On the basis of these results, more effective and useful administration of LAK cells is now under investigations by using the rats with brain tumors.