第35回 シークエンス技術の進歩 ～Frederic Sangerの貢献～

原典 　Sanger F, Nicklen S, Coulson AR：DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc Natl Acad Sci U S A 74：5463-5467, 1977. 要旨 　DNAの新規な塩基配列決定法であるジデオキシ法を述べる。一本鎖DNAを鋳型にオリゴヌクレオチドをプライマーにして，DNA合成酵素でDNA鎖を伸長させる。この反応液にジデオキシヌクレオチド三リン酸を混在させると，ジデオキシヌクレオチドが取り込まれたDNA鎖はDNA合成酵素での伸長が停止する。４種のジデオキシヌクレオチド三リン酸で停止した反応液を，変性ポリアクリルアミドゲルを用いて電気泳動し，オートラジオグラフィーで塩基配列を決定する。本論文は65,700回以上引用され，その後のヒトゲノム解析に大きく貢献した。