各種遺伝子検査法の特徴―核酸増幅法を中心に

新しい知見

　遺伝子検査の新しいステージが展開されている．検出可能範囲や目的によって検出系を使い分けることなく，エキソン単位～染色体まで広領域を解析できるMLPA(multiplex ligation-dependent probe amplification)法が開発された．MLPA法はポリメラーゼ連鎖反応(polymerase chain reaction，PCR)増幅のための特異的プローブにユニーバサルプライマー(共通配列)を結合させている．特異的プローブ設定で欠失，挿入の解析ができ，またプローブの3′/5′部位をSNP(single nucleotide polymorphism)部位やメチル化部位に設定することでSNPタイピングやメチル化を解析することができる．検査の簡素化としてQP(quenching probe)法を利用した分析機器(i-densy^TM)が開発された．QP法は標的SNP領域をPCR増幅し，相補的配列のQProbe(蛍光標識したシトシン塩基を末端にもち解離すると発光)と結合しQProbeの解離温度の異なりで検出する．検体は，前処理・増幅・検出が一体化した試薬キットに分注後，専用機器にセットするだけと簡素化されている．主に投薬前診断を目的とした薬物代謝酵素SNPs検出用試薬が市販されている．