Japanese
English
研究
胃癌組織のパラフィン切片を用いたin situ Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reactionによるp53mRNAの検出―DNaseによる消化効果の検討
Detection of p 53 mRNA in Paraffin Embed-ded Gastric Cancer Tissue by In Situ Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction: Examination of the Digestion Effect by DNase
西野 信一
1
,
福地 邦彦
2
,
小林 英昭
1
,
嘉悦 勉
1
,
河村 正敏
1
,
草野 満夫
1
Nobukazu NISHINO
1
,
Kunihiko FUKUCHI
2
,
Hideaki KOBAYASHI
1
,
Tsutomu KAETSU
1
,
Masatoshi KAWAMURA
1
,
Mitsuo KUSANO
1
1昭和大学医学部第二外科学教室
2昭和大学医学部臨床病理学教室
1The Second Department of Surgery. Showa University, School of Medicine
2Department of Clinical Pathology, Showa University, School of Medicine
キーワード:
in situ Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction
,
in situ RT PCR
,
DNase
,
Proteinase K
Keyword:
in situ Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction
,
in situ RT PCR
,
DNase
,
Proteinase K
pp.823-826
発行日 1998年7月15日
Published Date 1998/7/15
DOI https://doi.org/10.11477/mf.1542903795
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in situ RT PCR法においてゲノムDNAの消化条件の設定は,重要な要因の1つである.われわれは胃癌組織のパラフィン切片を用いてゲノムDNAの消化条件の設定を目的とした.
①1N HCl室温30分間とDNase4倍希釈37℃16時間の条件でゲノムDNAが消化できた.②1N HCl室温30分とDNase2倍希釈,37℃4時間の条件でゲノムDNAの消化は不十分であり,消化には16時間を要した.③残存Proteinase Kを加熱処理で失活させることによりDNaseの消化作用を高めた.
これらの結果により,ゲノムDNAが消化できmRNAの局在を形態学的に確認でき臨床材料への応用が期待できる.
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