増刊号 免疫検査実践マニュアル
総論
Ⅱ．免疫学的測定法
5．標識免疫測定法
（4）蛍光イムノアッセイ（FIA）
橋本 琢磨
1
,
西部 万千子
2
1金沢大学医学部臨床検査医学
2金沢大学医学部附属病院検査部
pp.61-66
発行日 1994年4月15日
Published Date 1994/4/15
DOI https://doi.org/10.11477/mf.1543901883
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■蛍光測定の原理
光の照射により基底状態のπ電子が励起エネルギーを吸収し励起状態となり，基底状態に戻る際には光を放出する．放出される光子（蛍光）のエネルギーは，吸収される光子のエネルギーよりも常に小さい．このため蛍光スペクトルと吸収スペクトルを比較すると，蛍光帯は常に吸収帯より長波長側に現れる（stokes shift）．蛍光物質は特有のスペクトル特性を有するため，使用する蛍光物質については，励起スペクトルと蛍光スペクトルを測定し，各スペクトルの極大吸収を求めて試料測定時の励起波長（ex. max）ならびに蛍光波長（em. max）を選択する．蛍光物質の蛍光特性（蛍光スペクトル，蛍光強度，蛍光量子収率注1））は，溶液の環境因子，特に溶媒，温度，pHおよび化学構造の影響を強く受ける．
注1）吸収した光エネルギーが蛍光となる効率．
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