高感度測定への試み―チオ-NADを用いた酵素サイクリング法

1．はじめに

　臨床検査において測定の高感度化が望まされているが，その1つの方法として，酵素サイクリング法がある．酵素サイクリング法は酵素または補酵素の組み合わせにより，測定目的物質のみを増幅して定量する．いわば核酸増幅法であるPCRに匹敵する方法である、本法は酵素の基質特異性，反応特異性により目的物質のみを増幅させることから，検体中の共存物質による測定への影響を軽減させ，目的物質を増幅定量するものであり，比色測定，電気化学的測定が応用できる．また，蛍光や発光測定と組み合わせることにより，さらに高感度化が可能である．

　酵素サイクリング法には図1に示すように，A法：酸化酵素―脱水素酵素系，B法：チオ-NAD（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）系，C法：補酵素サイクリング系などがあるが，ここでは筆者らが開発した脱水素酵素と2種の補酵素（チオ-NAD：NADH）を組み合わせたユニークなB法：チオ-NAD法を紹介する．