PCRの基本原理と実際

Principle and practice of PCR

Point

●RT-PCRの“RT”は逆転写反応のことであり，リアルタイムPCRのリアルタイムの略ではない．RNAをPCRで増幅するには逆転写反応が必須である．

●グラム陰性桿菌好気好熱性の細菌Thermus aquaticus由来の酵素であるTaqポリメラーゼがPCR技術の確立に寄与した．

●リアルタイムPCR法は，PCR産物の増幅量をリアルタイムでモニターし解析する方法で，迅速性と定量性に優れている．インターカレーター法と蛍光標識プローブ法の2種類がある．

●感度の高い遺伝子検出法であっても，結果には判定保留域があることと，特にウイルスの場合，必ずしもウイルス遺伝子陽性＝感染性粒子でないことに留意する必要がある．