蛍光イメージングによる骨評価

Evaluation of Bone；Up Date from Research to Clinical Application. Analysis of bone tissues by using fluorescent imaging.

　近年，「蛍光イメージング技術」が急速に進歩し，個体・組織を生かしたままで，生きた細胞の動態を観察することが可能となってきた。我々は，組織深部の観察が可能な「二光子励起顕微鏡」を駆使して，マウスを生かしたままで骨組織内の細胞動態をリアルタイムで観察するイメージング方法を確立した。最近，この技術を用いて，骨表面上での生きた成熟破骨細胞の動態を可視化することに成功し，成熟破骨細胞の骨吸収がRANKL（receptor activator of NF-κB ligand）によって動的に制御されていることを明らかにした。 　本稿ではこの研究成果に加えて，骨組織の生体二光子励起イメージングの方法論や，骨評価のための新規ツールの開発についても概説する。

　Rapid development of fluorescent imaging techniques enables us to understand cellular dynamics in vivo. We have originally established an advanced imaging system for visualizing live bone tissues with intravital multiphoton microscopy. By means of the system we have recently succeeded in visualization of mature osteoclasts in live bones and revealed that RANKL regulates bone-resorptive functions of mature osteoclasts in vivo. We also developed new image analysis software for tracking morphological changes of mature osteoclasts and generated pH-sensing chemical fluorescent probes for detecting bone resorption at local sites on the bone surface. Here we show the latest data and the detailed methodology of intravital imaging of bone tissues, and also discuss its further application.